甜瓜游乐场汉化版18.0
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小分子照过紫外不能用。不管有没有皮春死,都不能再用于实验了。有兴趣的话可以做个流式,会发现紫外照射的洗吧早期凋亡会非常明显,后期就逐步喊袜凋亡了。做annexinV/PI的时候燃渗耐就是用紫外照射做阳性对照的。
博凌科为生物科技-为你解答:因为AnnexinV是Ca依赖的蛋白,所以不能蔽唯裂加入EDTA, 防止EDTA螯合了Ca离宏闭子从而影响annexinV,进而影响结果。所以可以用不含EDTA的胰酶,放入温箱内进行消化,时间可以长一点,随时观察细胞情况,避免消化过度。建议用细胞刮子把细胞刮下来,然后用枪吹匀,比消化山世还简单,而且也避免了胰酶带来的损伤,机械的损伤还是很小的因为细胞大多呈大片大片地被刮下来。
Q1:(AnnexinV-FITC)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。
Q2:(AnnexinV+FITC)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞。
Q3:(AnnexinV-FITC)+/PI-,此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4:(AnnexinV-FITC)-/PI-,此区域的细胞为活细胞。
资料扩展册培:
细胞(英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物,高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类,但也有人提出应分为三类,即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞乎陵生物学。
细胞体形极微,在显微镜下始能窥见,形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成,表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁,细胞质中常有质体,体内有叶岁姿戚绿体和液泡,还有线粒体。动物细胞无细胞壁,细胞质中常有中心体,而高等植物细胞中则无。
已好弯经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了。我用的是AnnexinV-FITC 凋亡试剂盒 ,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡。请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表枝悄什么细胞?手里的资料说法都不相同。试剂盒说明书:1代表细胞收集过程中机械性损伤的细胞,2 代表继发性坏死细胞,4代表凋亡细胞。有资料说:1代表坏死细胞,2代表晚期凋亡细胞,4代表早期凋亡细胞。我就不明白了,既然是凋亡,就算是晚期,细胞膜也会破坏?还有的认为,2象限代表晚期凋亡和继发猛袜渣性坏死的细胞。
我用的是美国Beckman-Coulter公司试剂盒,它的说明说上就是这么写的:
Quadrant 3:viable cells
Quadrant 4:apoptotic cells
Quadrant 2:secondary necrotic cells
这种说法在园子里还没见过。
应该以说明书为准吗?我很迷茫。请您指点。
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